(一)分泌物直接涂片
取样可为阴道、宫颈管分泌物，或尿道分泌物，或腹腔液(经后穹窿、腹壁，或经腹腔镜获得)，做直接薄层涂片，干燥后以美蓝或革兰染色。凡在多形核白细胞内见到革兰阴性双球菌者，则为淋病感染。因为宫颈管淋菌检出率只有67%，所以涂片阴性并不能除外淋病存在，而阳性涂片是很有特异性的。沙眼衣原体的镜检可采用荧光素单克隆抗体染料，凡在荧光显微镜下观察到一片星状闪烁的荧光点即为阳性。
(二)病原体培养
标本来源同上，应立即或在30s内将其接种于Thayer-Martin培养基上，置35℃温箱培养48h，以糖酵解进行细菌鉴定。新的相对快速的衣原体酶测定代替了传统的衣原体的检测方法，也可用哺乳动物细胞培养进行对沙眼衣原体抗原检测，此法系酶联免疫测定。敏感性平均为89.5%，有98.4%的特异性。
细菌学培养还可以得到其他需氧和厌氧菌株，并作为选择抗生素的依据。
(三)后穹窿穿刺
后穹窿穿刺是妇科急腹症最常用且有价值的诊断方法之一。通过穿刺，所得到的腹腔内容或子宫直肠窝内容，如正常腹腔液、血液(新鲜、陈旧、凝血丝等)、脓性分泌物或脓汁，都可使诊断进一步明确，穿刺物的镜检和培养更属必要。
